談談影響總氮和氨氮準確性的因素

　　環(huán)境水體中存在多種形式的含氮化合物，它們由于化學和生化作用而不斷變化和循環(huán)。各種含氮化合物，包括有機氮化合物和無機氮化合物，在水體中往往通過降解、分解、氧化等復雜過程發(fā)生變化，最終變成硝酸鹽。因此，分析測定各種形態(tài)氮的含量，不僅是了解水體污染情況的必要條件，而且在環(huán)境化學和環(huán)境醫(yī)學中也具有重要意義。

　　總氮的定義是水中各種形式的無機和有機氮的總量，包括NO3-、NO2-、NH4+等無機氮和蛋白質(zhì)、氨基酸、有機胺等有機氮，以氮的毫克數(shù)表示每升水計算。氨氮是指水中以游離氨（NH3）和銨離子（NH4+）形式存在的氮。兩者都經(jīng)常用來表示水體被營養(yǎng)物質(zhì)污染的程度。影響兩種結果準確性的因素：

　　1、實驗室環(huán)境因素

　　總氮和氨氮的分析應在無氨的實驗室環(huán)境中進行，環(huán)境中不得含有石油和其他氮化合物，不得在分析氨氮等氮項目的實驗室中進行總氮分析。所用試劑和玻璃器皿也應分開存放，并保持干燥、清潔，避免交叉污染。

　　2、樣品保存時間和溫度因素

　　由于樣品中的氮化合物是不斷變化的，所以水樣采集后應立即檢測或放入冰箱在低于4℃的條件下保存，但不超過24h。若長期存放，可在1000ml水樣中加入0.5ml硫酸（1.84g/ml），酸化pH小于2，應盡快進行測定。在樣本采集過程中，應考慮與外界空氣交叉污染的可能性，做到與外界空氣交叉污染的可能性，取樣后應及時封存。避免光線引起的溫度變化和實驗室內(nèi)部環(huán)境引起的誤差。

　　3、試劑和制備方法的選擇因素

　　任何溶液的制備都離不開水這一介質(zhì)。首先是制備無氨水，因為在制備無氨水的過程中，空氣中的氨或銨鹽難免溶于水，污染試劑水。這種環(huán)境會給試劑空白帶來難以消除的錯誤。特別是會增加總氮的試劑空白，使總氮的檢測值小于實際值。因此，配制無氨純水時，一定要妥善保存，要盡快配制。由于總氮的測定依據(jù)《堿性過硫酸鉀消解紫外分光光度法》（GB11894-89），該方法雖然步驟比較簡單，對設備要求不高，但對空白試驗的吸光度有嚴格要求，影響空白的主要因素是過硫酸鉀的質(zhì)量。在制備堿性過硫酸鉀溶液的過程中，建議先制備氫氧化鈉溶液，再制備過硫酸鉀溶液。由于過硫酸鉀溶解很慢，可用水浴加熱，加熱溫度控制在55～60℃之間。當過硫酸鉀溶液完全溶解并冷卻至室溫時，將其緩慢加入氫氧化鈉溶液中。同時攪拌，防止氫氧化鈉放熱導致溶液溫度過高導致過硫酸鉀局部失效。當過硫酸鉀試劑質(zhì)量不合格時，會導致空白值偏高，甚至嚴重影響樣品結果。因此，配制堿性過硫酸鉀溶液時，水浴溫度應盡量控制在50～60℃之間，否則過硫酸鉀會分解導致失效，影響結果。

　　4、水樣色度和濁度的影響

　　由于水樣未經(jīng)處理或混凝沉淀，氨氮結果偏大，色度和渾濁度高溫消解40min后，發(fā)現(xiàn)比色管底部有白色沉淀，水樣無色透明，消除了對總氮結果的影響。因此，在氨氮的檢測中，如果混凝沉淀不能去除色度和沉淀，則采用蒸餾法進行沉淀，可以更好地消除大氨氮對結果的影響。

　　5、消解、比色時間因素

　　由于“奈斯勒試劑分光光度法”測定氨氮的過程中沒有繁瑣的步驟，只需要10min的顯色時間，在檢測期間幾乎沒有氨氮的損失，而且在總的檢測過程中氮，分解后的原子氧在120℃～124℃消解30min，可將水樣中含氮化合物的氮元素轉化為硝酸鹽，根據(jù)220nm和275nm波長處的吸光度計算總氮含量.但由于壓力鍋內(nèi)的溫度、試劑等問題，過硫酸鉀往往沒有很好地消解，比色管的地塞沒有牢固關閉，導致氨氣揮發(fā)，樣品在蒸煮過程中蒸發(fā)。消解過程中，導致后續(xù)在標線處加入純水，而樣品體積總氮含量的增加會導致總氮小于或等于氨氮。

　　6、鉀、鈉、酒石酸銨含量高的影響

　　制備氨氮所需藥物時，應注意鉀、鈉、酒石酸銨含量高時，氨氮含量會偏大，結果大于總氮。酒石酸鉀鈉僅加熱煮沸并不能完全除去氨，應加入少量氫氧化鈉溶液煮沸，使溶液體積的25%左右蒸發(fā)。銨鹽使結果更準確。